【Bradford法】在生物化学和分子生物学领域，蛋白质的定量分析是一项基础而关键的工作。为了准确测定样品中的蛋白质含量，研究人员常常依赖多种方法，其中“Bradford法”因其简便、快速和灵敏度高而被广泛使用。该方法由Marion M. Bradford于1976年首次提出，因此得名。

Bradford法的核心原理基于考马斯亮蓝G-250（Coomassie Brilliant Blue G-250）染料与蛋白质之间的相互作用。在酸性条件下，这种染料会与蛋白质结合，并发生颜色变化，从棕红色转变为蓝色。这种颜色变化的强度与蛋白质浓度成正比，因此可以通过分光光度计在595 nm波长下测量吸光度，从而计算出蛋白质的含量。

相较于其他蛋白质定量方法，如Lowry法或紫外吸收法，Bradford法具有几个显著的优势。首先，它操作简单，不需要复杂的预处理步骤，适合快速检测；其次，其灵敏度较高，能够检测到低至1–10 µg/mL的蛋白质浓度；此外，许多常见的干扰物质（如糖类、盐类等）对Bradford法的影响较小，使得该方法在实际应用中更加稳定可靠。

然而，Bradford法也存在一定的局限性。例如，不同类型的蛋白质与染料的结合能力存在差异，这可能导致定量结果出现偏差。因此，在进行精确测量时，通常建议使用与样品中蛋白质类型相似的标准蛋白来建立标准曲线，以提高准确性。

在实验过程中，正确配制试剂、控制反应时间以及选择合适的仪器参数都是确保实验结果可靠的关键因素。此外，由于Bradford法对某些特定氨基酸（如精氨酸、组氨酸）的响应较强，若样品中含有大量此类氨基酸，可能会导致结果偏高。

综上所述，Bradford法作为一种经典的蛋白质定量方法，凭借其简便性和高效性，已成为实验室中不可或缺的工具之一。尽管存在一定的局限性，但通过合理的设计和操作，仍能为科学研究提供可靠的定量数据支持。